選擇一款適合梯度PCR儀應(yīng)該注意什么

　　PCR技術(shù)是一種用于放大擴增特定的DNA的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，目前市場上常見的有：普通PCR儀、梯度PCR儀、原位PCR儀、熒光定量PCR儀(qPCR)以及數(shù)字PCR儀(dPCR)等。而使用多是梯度PCR儀和熒光定量PCR儀，那么怎樣選擇一款適合自己的梯度PCR儀呢？

　　1 準(zhǔn)確的溫度控制系統(tǒng)

　　對PCR儀來說，溫度控制指標(biāo)主要是指溫度的準(zhǔn)確性、均一性、以及升降溫速度。

　　溫度的準(zhǔn)確性：是指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性，它直接關(guān)系到實驗的成敗。由于PCR是一個幾何級數(shù)擴增的過程，不論是變性、退火還是延伸都需要準(zhǔn)確控制溫度，對退火溫度而言溫控顯的尤為重要，有時1°甚至0.5°的差異也能決定實驗的成功與失敗，所謂差之毫厘，謬之千里。因而對PCR擴增儀而言溫度控制就意味著質(zhì)量。eg：HealForce B960的溫度準(zhǔn)確性嚴(yán)格控制在≤0.1℃。(國內(nèi)大部分廠家僅要求≤0.2℃)

　　溫度的均一性：是指樣品孔間的溫度差異，它關(guān)系到在不同樣品孔進行反應(yīng)結(jié)果的一致性。有用戶發(fā)現(xiàn)用同樣的樣品，同樣的PCR反應(yīng)程序，后的結(jié)果竟然差異非常明顯，或許就是因為不同位置的溫度不均勻所致。同時位置邊緣效應(yīng)對PCR實驗可重復(fù)性影響非常明顯。

　　升降溫速率：更快的升降溫速度，可以縮短反應(yīng)進行的時間，而且縮短了可能的非特異性結(jié)合、反應(yīng)的時間，能提高PCR反應(yīng)的特異性。

　　2  儀器的功能性和人性化設(shè)計

　　越友好的操作界面、完善的功能以及人性化的設(shè)計更能吸引用戶。(熱蓋、樣品座、軟件)

　　熱蓋：現(xiàn)在的PCR儀一般均配備熱蓋，熱蓋溫度設(shè)為105℃，使樣品管頂部的溫度達到105℃左右，蒸發(fā)的反應(yīng)液就不會產(chǎn)生凝集在管蓋上而改變反應(yīng)體積，這樣用戶就無需再向反應(yīng)管內(nèi)加石蠟油，直接減少后繼反應(yīng)的麻煩。HealForce熱蓋溫度范圍為：20-110℃。

　　樣品座：PCR反應(yīng)多在0.2或者0.5的管子中進行，多數(shù)PCR儀也配備了不同的可更換樣品槽適配不同的樣品管。HealForce PCR儀一個槽內(nèi)帶有0.2和0.5兩種不同樣品孔，不需更換基座就可以分別使用兩種不同的反應(yīng)管，或者96孔板，避免了換基座的麻煩。

　　軟件：新的PCR儀都比較注重程序編寫的簡易性。大屏幕，顯示實時信息，倒計時，記憶存儲多個程序、自動斷電保護等都有助于實驗室中的復(fù)雜環(huán)境使用。HealForce T960和B960 PCR儀基于Windows操作系統(tǒng)，配備了PC端軟件，可以實現(xiàn)智能化操控。